#8 HPV PCR 실험 : Genomic Pub

[PCR]#8 HPV PCR 실험

이경진

2021-04-28

1. 개요 및 목적

1. 개요 및 목적

HPV(Human papillomavirus)는 인간 유두종바이러스라고 하며 DNA 기반의 바이러스로 사람을 비롯한 여러 동물의 피부나 피하에 감염된다.

현재 130여종의 바이러스가 발견되었으며 그 중 HPV16, 18이 전 세계 자궁경부암 환자의 70%에서 발견되고 있는 고위험군이다.

Conventional PCR을 통해 이 두 타입의 DNA를 증폭시키고 전기영동을 통해 결과를 확인해 볼 수 있다.

2.실험 재료 및 기기

2. 실험 재료 및 기기

실험 재료

*Taq polymerase (1unit/ul), 10X taq buffer, **dNTP mix (25mM), HPV Primer set (Forward, Reverse), HPV16, 18 DNA, dH₂O,

DNA ladder

*Taq polymerase: Thermus aquaticus라는 미생물에서 유래한 중합효소로 열에 안정적이며 DNA를 합성하는 효소이다.

**dNTP: 핵산의 구성 성분으로 중합효소가 DNA를 합성할 때 기질 역할을 한다. dNTP는 단순한 PCR 반응의 구성 요소 역할 뿐 아니라 중합효소가

핵산을 합성하는데 필요한 에너지를 제공하는 역할도 한다.

HPV_F: TTTGTTACTGTGGTAGATACCAC

HPV_R: GAAAAATAAACTGTAAATCATATTC

실험 기기

Conventional PCR (ex.DuxCycler-바이오메듀스)

DNA Electrophoresis (ex.DuxGeldoc- 바이오메듀스,한국)

3. 실험 방법 및 절차

3. 실험 방법 및 절차

① HPV16, 18 DNA를 10배씩 희석하여 준비한다.

	Sample 1	Sample 2	Sample 3	Sample 4	Sample 5	Sample 6	Sample 7
DNA	DNA 2ul	Sample 1의 DNA 2ul	Sample 2의 DNA 2ul	Sample 3의 DNA 2ul	Sample 4의 DNA 2ul	Sample 5의 DNA 2ul	Sample 6의 DNA 2ul
dH₂O	18ul	18ul	18ul	18ul	18ul	18ul	18ul
Total	20ul	20ul	20ul	20ul	20ul	20ul	20ul

② PCR 샘플 시약 조성